Чувствительность и специфичность набора реагентов для выявления антител к вирусу Хунин методом иммуноферментного анализа

Статья в Elpub

Вопросы вирусологии. 2015; 60: 46-49

Чувствительность и специфичность набора реагентов для выявления антител к вирусу Хунин методом иммуноферментного анализа

Пирожков А. П., Тимофеев М. А., Борисевич И. В., Сыромятникова С. И., Шатохина И. В., Пантюхов В. Б., Ковальчук А. В., Борисевич С. В.

Аннотация

В статье обсуждаются методические подходы, использованные для определения чувствительности и специфичности набора реагентов для выявления антител к вирусу Хунин методом иммуноферментного анализа (ИФА). Сравнение ИФА и реакции нейтрализации (РН) показало наличие прямой зависимости между уровнем титров антител в сыворотках крови иммунизированных животных, определяемых обоими методами. Полученные результаты позволили сформировать панели положительных и отрицательных сывороток крови для определения чувствительности и специфичности разработанного набора реагентов. Чувствительность набора реагентов при изучении проб сывороток крови иммунизированных морских свинок и кроликов (определяемых в РН как положительные) составила не менее 98%. При изучении проб, которые определяются в РН как сомнительные, чувствительность набора реагентов составила не менее 68% при специфичности 98%.

Список литературы

1. De Bracco M.E., Rimoldi M.T. Argentine hemorrhagic fever. Jour- nal of Medicine. 1970; 299 (5): 216–21.

2. Maiztegui J.I. Clinical and epidemiological patterns of Argentine haemorrhagic fever. Bulletin of The World Health Organization. 1975; 52 (4–6): 567–75.

3. Peters C.J. Arenaviruses. In: Richman D.D., Whitley R.J., Hayden F.G., eds. Clinical Virology, 2rd ed. Washington: ASM Press; 2002: 949–69.

4. Enria D.A., Briggiler A.M., Fernandez N.J. Importance of dose of neutralising antibodies in treatment of Argentine haemorrhagic fever with immune plasma. Lancet. 1984; 8397: 255–6.

5. Maiztegui J.I., Fernandez N.J., de Damilano A.J. Efficacy of immune plasma in treatment of Argentine haemorrhagic fever and association between treatment and a late neurological syndrome. Lancet. 1979; 324 (8154): 1216–7.

6. Strickland T.G., Mills J.N., McKee Jr K.T. South American Hemor- rhagic Fevers. Hunter’s Tropical Medicine and Emerging Infectious Diseases. 2000; 31 (3): 279–81.

7. Childs J.E., Peters C.J. Ecology and epidemiology of arenaviruses and their hosts. In: Saivato M.S., eds. The Arenaviridae. Plenum. New York; 1993: 331–73.

8. Bowen M.D., Peters C.J., Nichol S.T. Phylogenetic analysis of the Arenaviridae: Patterns of virus evolution and evidence for cospecia- tion between arenaviruses and their rodent hosts. Molecular Phylo- genetics and Evolution. 1997; 8: 301–16.

9. Онищенко Г.Г., Васильев Н.Т., Максимов В.А., Борисевич И.В., Марков В.И. Центр специальной лабораторной диагностики и лечения особо опасных и экзотических инфекционных заболеваний в системе противоэпидемической защиты территории Российской Федерации. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2001; 6: 114–5.

10. Борисевич И.В., Михайлов В.В., Потрываева Н.В., Малинкин Ю.Н., Кириллов А.П., Краснянский В.П. и др. Разработка иммуноферментной тест-системы для определения антигена вируса Эбола. Вопросы вирусологии. 1996; 41 (5): 232–4.

11. Орлова С.В., Годнева А.Т., Игнатьев Г.М. Иммунизация кроликов вирусом Ласса. Вопросы вирусологии. 1990; 35 (1): 59–61.

12. Пирожков А.П., Борисевич И.В., Снеткова О.Ю., Андрощук И.А., Сыромятникова С.И., Хмелев А.Л. и др. Стабилизация пероксидазных конъюгатов иммуноферментных наборов реагентов для выявления антигенов вирусов Эбола и Марбург. Вопросы вирусологии. 2010; 55 (1): 45–8.

13. Пирожков А.П., Борисевич И.В., Хмелев А.Л., Снеткова О.Ю., Марков В.И., Максимов В.А. и др. Разработка иммуноферментных тест-систем для диагностики особо опасных геморрагических лихорадок. Биотехнология. 2009; 4: 91–5.

14. Хмелев А.Л., Борисевич И.В., Пантюхов В.Б., Пирожков А.П., Сыромятникова С.И., Шатохина И.В. и др. Использование морских свинок для оценки эффективности гетерологичного иммуноглобулина против Боливийской геморрагической лихорадки. Вопросы вирусологии. 2009; 54 (4): 42–4.

15. Ашмарин И.П., Воробь ев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Гос. изд. мед. лит.; 1962.

16. Здродовский П.Ф., Соколов М.И., ред. Руководство по лабораторной диагностике вирусных и риккетсиозных болезней. М.; 1965.

17. Канаев А.Н., Воробьева М.С., Шалунова И.В., Перебоева Л.А., Максютов А.З., Киселев Н.Н. и др. Конструирование стандартных панелей сывороток с нормированным уровнем IgG-антител. Вопросы вирусологии. 1996; 4: 161–6.

Problems of Virology. 2015; 60: 46-49

Sensitivity and specificity of the elisa kit for the detection of antidobies to Junin virus

Pirozhkov A. P., Timofeev M. A., Borisevich I. V., Syromiatnikova S. I., Shatokhina I. V., Pantyukhov V. B., Kovalchuk A. V., Borisevich S. V.

Abstract

The goal of this work was to describe methodological approaches to determination of sensitivity and specificity of the enzyme-linked immunosorbent assay kit (ELISA Kit) for detection of the specific anti-Junin virus (JV) antibody. Comparison of ELISA to plaque reduction neutralization test (PRNT) showed direct relationship between antibody titers in the samples of serum of immunized animals, determined by either PRNT or ELISA methods. The obtained results provided an opportunity to form the panels of positive and negative serum samples to determine the sensitivity and specificity of the ELISA Kit. Sensitivity of the ELISA Kit was at least 98% when studying the samples of serum of immunized guinea pigs and rabbits (determined as positive in PRNT). The sensitivity of the ELISA Kit was at least 68% when studying the samples determined by PNRT as uncertain positive. The specificity was 98%. The specificity of the ELISA Kit was 98%.

References

1. De Bracco M.E., Rimoldi M.T. Argentine hemorrhagic fever. Jour- nal of Medicine. 1970; 299 (5): 216–21.

2. Maiztegui J.I. Clinical and epidemiological patterns of Argentine haemorrhagic fever. Bulletin of The World Health Organization. 1975; 52 (4–6): 567–75.

3. Peters C.J. Arenaviruses. In: Richman D.D., Whitley R.J., Hayden F.G., eds. Clinical Virology, 2rd ed. Washington: ASM Press; 2002: 949–69.

4. Enria D.A., Briggiler A.M., Fernandez N.J. Importance of dose of neutralising antibodies in treatment of Argentine haemorrhagic fever with immune plasma. Lancet. 1984; 8397: 255–6.

6. Strickland T.G., Mills J.N., McKee Jr K.T. South American Hemor- rhagic Fevers. Hunter’s Tropical Medicine and Emerging Infectious Diseases. 2000; 31 (3): 279–81.

7. Childs J.E., Peters C.J. Ecology and epidemiology of arenaviruses and their hosts. In: Saivato M.S., eds. The Arenaviridae. Plenum. New York; 1993: 331–73.

9. Onishchenko G.G., Vasil'ev N.T., Maksimov V.A., Borisevich I.V., Markov V.I. Tsentr spetsial'noi laboratornoi diagnostiki i lecheniya osobo opasnykh i ekzoticheskikh infektsionnykh zabolevanii v sisteme protivoepidemicheskoi zashchity territorii Rossiiskoi Federatsii. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunologii. 2001; 6: 114–5.

10. Borisevich I.V., Mikhailov V.V., Potryvaeva N.V., Malinkin Yu.N., Kirillov A.P., Krasnyanskii V.P. i dr. Razrabotka immunofermentnoi test-sistemy dlya opredeleniya antigena virusa Ebola. Voprosy virusologii. 1996; 41 (5): 232–4.

11. Orlova S.V., Godneva A.T., Ignat'ev G.M. Immunizatsiya krolikov virusom Lassa. Voprosy virusologii. 1990; 35 (1): 59–61.

12. Pirozhkov A.P., Borisevich I.V., Snetkova O.Yu., Androshchuk I.A., Syromyatnikova S.I., Khmelev A.L. i dr. Stabilizatsiya peroksidaznykh kon\"yugatov immunofermentnykh naborov reagentov dlya vyyavleniya antigenov virusov Ebola i Marburg. Voprosy virusologii. 2010; 55 (1): 45–8.

13. Pirozhkov A.P., Borisevich I.V., Khmelev A.L., Snetkova O.Yu., Markov V.I., Maksimov V.A. i dr. Razrabotka immunofermentnykh test-sistem dlya diagnostiki osobo opasnykh gemorragicheskikh likhoradok. Biotekhnologiya. 2009; 4: 91–5.

14. Khmelev A.L., Borisevich I.V., Pantyukhov V.B., Pirozhkov A.P., Syromyatnikova S.I., Shatokhina I.V. i dr. Ispol'zovanie morskikh svinok dlya otsenki effektivnosti geterologichnogo immunoglobulina protiv Boliviiskoi gemorragicheskoi likhoradki. Voprosy virusologii. 2009; 54 (4): 42–4.

15. Ashmarin I.P., Vorob' ev A.A. Statisticheskie metody v mikrobiologicheskikh issledovaniyakh. L.: Gos. izd. med. lit.; 1962.

16. Zdrodovskii P.F., Sokolov M.I., red. Rukovodstvo po laboratornoi diagnostike virusnykh i rikketsioznykh boleznei. M.; 1965.

17. Kanaev A.N., Vorob'eva M.S., Shalunova I.V., Pereboeva L.A., Maksyutov A.Z., Kiselev N.N. i dr. Konstruirovanie standartnykh panelei syvorotok s normirovannym urovnem IgG-antitel. Voprosy virusologii. 1996; 4: 161–6.